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非靶向代謝組學

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非靶向代謝組學(Untargeted Metabolomics),也稱為非目標代謝組學或發現代謝組學,無偏向性地對所有小分子代謝物同時進行檢測分析的代謝組學。
產品詳情

一、項目介紹

代謝組(Metabolme)指參與新陳代謝、維持生物體正常生長功能和生長發育的所有內源小分子。代謝組學(Metabolmics)是研究生物體系(細胞、組織 或生物體)受刺激或擾動后(如基因改變或環境變化后)其代謝產物(內源性代謝物質)種類、數量及其變化規律的科學。研究對象:一般來說,150Da以下的小分子物質。

二、項目內容

1.非靶向代謝組學

非靶向代謝組學(Untargeted Metabolomics),也稱為非目標代謝組學或發現代謝組學,無偏向性地對所有小分子代謝物同時進行檢測分析的代謝組學。

實驗流程:

三、送樣要求

樣本類型

樣本量

簡要采集方法

注意事項

植物組織

 ≥1g/例

采集后迅速液氮中冷凍,做好標記,儲存于液氮或-80℃冰箱中。


動物組織

≥500mg/例

采集后用生理鹽水清洗殘留血液,在冰上將組織樣本切割成 20~50 mg 左右的小塊,置于液氮中速凍約 10 s,將速凍后的組織塊分裝凍存管中,做好標記,儲存于液氮或-80℃冰箱中。

麻醉劑建議使用異氟醚;大塊組織需要切成小塊,方便儲存和取樣。

微生物

干重

≥250mg/例

采集適量菌液置于無菌離心管中,在4,000 g,4℃下離心 3 min,分離菌體,用預冷 PBS 溶液清洗菌體兩遍。4,000 g,4℃下離心 3 min,分離得到菌體,液氮淬滅。收集干凈菌體即可用于細胞內代謝物分析,上清液可用于細胞外代謝物分析,儲存于液氮或-80℃冰箱中。


細胞

1×107 /例

  1. 貼壁細胞:取對數生長期細胞,去掉培養液,用適量預冷 PBS 清洗兩遍,再加入少量 PBS,用細胞鏟刮下細胞,置于 1.5 mL 離心管中,在 1,000 g,4℃離心 1 min,液氮淬滅。

  2. 懸浮細胞:取對數生長期細胞液,在 1,000 g,4℃離心 1 min,去掉培養液,使用預冷 PBS  清洗細胞兩遍,置于 1.5  mL 離心管中,在 1 000 g 離心 1 min,液氮淬滅。

  3. 收集的細胞即可用于細胞內代謝物分析,上清液可用于細胞外代謝物分析。所有樣本均做好標記,儲存于液氮或-80℃冰箱中。

采集過程中需要對細胞進行計數,數量為≥107/例,務必保持樣本量的一致性。

尿液

動物:

≥250 μL/例

臨床樣本:

≥1 mL/例

尿液 8,000 rpm,10 min,離心,用移液器小心吸取上清,分裝至凍存管中,儲存于液氮或-80℃冰箱中。

動物樣本如大鼠,需添加疊氮化鈉作為防腐劑。

糞便

≥500mg/例

  1. 動物自然排便法:將實驗動物置于代謝籠中,1 只/籠,收集 12 h 或 24 h 糞便;

  2. 動物腸道提取法:處死動物后,分離腸道,提取內容物;

  3. 人糞便采集:采集前先排尿。患者將糞便排于清潔、干燥、無吸水性的容器內,用小勺分別取兩端和中部的內外部的糞便樣本。采集糞便后,放入做好標記的凍存管中,立即置于液氮中速凍,儲存于液氮灌或-80℃冰箱中。


血漿

≥250μL/例

全血采集至抗凝blood collection管(紫頭血液采集管)后,1,600 g離心,時間 15 min,溫度 4℃。離心后用移液器小心吸取上部清液至潔凈的離心管中并分裝至凍存管中,做好標記。置于液氮中速凍,后儲存于液氮或-80℃冰箱中。

避免溶血,避免反復凍融。

血清

≥250μL/例

紅頭血液采集管采集到的全血室溫下放置 30 min;凝血結束后,離心條件為:1,500 g離心力,時間 10 min。離心后上清液即為血清,用移液器小心吸取并分裝至潔凈的凍存管中,做好標記置于液氮中速凍,儲存于液氮或-80℃冰箱中。

避免溶血,避免反復凍融。

體液

500μL×2

  1. 采用刮板收集,注意避免使用棉簽或金屬材質,以玻璃、聚丙烯為最佳,可以使用木質材料。離心取上清后分裝,每管不低于 500μL(精確量取),-80℃凍存。

  2. 吸取采集后,離心取上清后分裝,每管不低于 500μL(精確量取),-80℃凍存



非靶向代謝組學

非靶向代謝組學

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非靶向代謝組學(Untargeted Metabolomics),也稱為非目標代謝組學或發現代謝組學,無偏向性地對所有小分子代謝物同時進行檢測分析的代謝組學。
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一、項目介紹

代謝組(Metabolme)指參與新陳代謝、維持生物體正常生長功能和生長發育的所有內源小分子。代謝組學(Metabolmics)是研究生物體系(細胞、組織 或生物體)受刺激或擾動后(如基因改變或環境變化后)其代謝產物(內源性代謝物質)種類、數量及其變化規律的科學。研究對象:一般來說,150Da以下的小分子物質。

二、項目內容

1.非靶向代謝組學

非靶向代謝組學(Untargeted Metabolomics),也稱為非目標代謝組學或發現代謝組學,無偏向性地對所有小分子代謝物同時進行檢測分析的代謝組學。

實驗流程:

三、送樣要求

樣本類型

樣本量

簡要采集方法

注意事項

植物組織

 ≥1g/例

采集后迅速液氮中冷凍,做好標記,儲存于液氮或-80℃冰箱中。


動物組織

≥500mg/例

采集后用生理鹽水清洗殘留血液,在冰上將組織樣本切割成 20~50 mg 左右的小塊,置于液氮中速凍約 10 s,將速凍后的組織塊分裝凍存管中,做好標記,儲存于液氮或-80℃冰箱中。

麻醉劑建議使用異氟醚;大塊組織需要切成小塊,方便儲存和取樣。

微生物

干重

≥250mg/例

采集適量菌液置于無菌離心管中,在4,000 g,4℃下離心 3 min,分離菌體,用預冷 PBS 溶液清洗菌體兩遍。4,000 g,4℃下離心 3 min,分離得到菌體,液氮淬滅。收集干凈菌體即可用于細胞內代謝物分析,上清液可用于細胞外代謝物分析,儲存于液氮或-80℃冰箱中。


細胞

1×107 /例

  1. 貼壁細胞:取對數生長期細胞,去掉培養液,用適量預冷 PBS 清洗兩遍,再加入少量 PBS,用細胞鏟刮下細胞,置于 1.5 mL 離心管中,在 1,000 g,4℃離心 1 min,液氮淬滅。

  2. 懸浮細胞:取對數生長期細胞液,在 1,000 g,4℃離心 1 min,去掉培養液,使用預冷 PBS  清洗細胞兩遍,置于 1.5  mL 離心管中,在 1 000 g 離心 1 min,液氮淬滅。

  3. 收集的細胞即可用于細胞內代謝物分析,上清液可用于細胞外代謝物分析。所有樣本均做好標記,儲存于液氮或-80℃冰箱中。

采集過程中需要對細胞進行計數,數量為≥107/例,務必保持樣本量的一致性。

尿液

動物:

≥250 μL/例

臨床樣本:

≥1 mL/例

尿液 8,000 rpm,10 min,離心,用移液器小心吸取上清,分裝至凍存管中,儲存于液氮或-80℃冰箱中。

動物樣本如大鼠,需添加疊氮化鈉作為防腐劑。

糞便

≥500mg/例

  1. 動物自然排便法:將實驗動物置于代謝籠中,1 只/籠,收集 12 h 或 24 h 糞便;

  2. 動物腸道提取法:處死動物后,分離腸道,提取內容物;

  3. 人糞便采集:采集前先排尿。患者將糞便排于清潔、干燥、無吸水性的容器內,用小勺分別取兩端和中部的內外部的糞便樣本。采集糞便后,放入做好標記的凍存管中,立即置于液氮中速凍,儲存于液氮灌或-80℃冰箱中。


血漿

≥250μL/例

全血采集至抗凝blood collection管(紫頭血液采集管)后,1,600 g離心,時間 15 min,溫度 4℃。離心后用移液器小心吸取上部清液至潔凈的離心管中并分裝至凍存管中,做好標記。置于液氮中速凍,后儲存于液氮或-80℃冰箱中。

避免溶血,避免反復凍融。

血清

≥250μL/例

紅頭血液采集管采集到的全血室溫下放置 30 min;凝血結束后,離心條件為:1,500 g離心力,時間 10 min。離心后上清液即為血清,用移液器小心吸取并分裝至潔凈的凍存管中,做好標記置于液氮中速凍,儲存于液氮或-80℃冰箱中。

避免溶血,避免反復凍融。

體液

500μL×2

  1. 采用刮板收集,注意避免使用棉簽或金屬材質,以玻璃、聚丙烯為最佳,可以使用木質材料。離心取上清后分裝,每管不低于 500μL(精確量取),-80℃凍存。

  2. 吸取采集后,離心取上清后分裝,每管不低于 500μL(精確量取),-80℃凍存



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